心钠素放免药盒操作说明书
ANP（HY-10046） RIA KIT
心钠素（Atrial Natriuretic Polypeptide ANP）又称心房利钠因子（ANF），是心房生成和分泌的一种生物活性多肽激素，可以直接释放到血液中，具有强大的利钠、利尿、舒张血管和降低血压作用。本试剂盒为心血管、内分泌、肾脏病等方面的基础和临床研究、心血管疾病的诊断分型和治疗以及探讨ANP的分泌、生理作用、代谢和调节提供了一项灵敏可靠的指标。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 ANP 标记二瓶；两瓶混匀后使用。 2、ANP抗体一瓶； 3、缓冲液一瓶；
4、PR分离剂（第二抗体）一瓶； 5、10%EDTA . Na2一瓶； 6、抑肽酶一瓶；
7、ANP 标准品5瓶：浓度分别分别为50、150、450、800、1600pg/ml；
样品收集：
1、取空腹静脉血2ml注入含有10%EDTA . Na2 30ul和抑肽酶10ul（含100U/ml以上）试管中，混匀立即放4℃ 3000rpm/ min 离心10min，分离血浆，如需要可分成2-3份，-20℃保存2个月。-70℃以下可保存半年。测定前，将样品于室温或冷水中复融，再次4℃3000 rpm/ min 离心15min取上清测定。
2.组织样品的处理：
取出活组织，吸去血迹，称取30-50mg，尽快放入0.2mol/L HAC，略作碾磨，然后放100℃水浴中煮沸10分钟，制成匀浆，4℃3000 rpm/ min离心15min取上清测定-20℃以下保存。测定时用0.2mol/L pH 7.4 PBS 5倍以上稀释。以调节pH值。
注：如组织样品含量太低，不需稀释时应将每份组织标本调节pH值为pH 6.5-7.0，
4℃3000rpm/ min 离心15min取上清测定。另外每种组织非特异结合（U0）可能有差异，每份标本最好单独做一个U0，取组织的重量视不同组织而异。
测定方法：
ANP RIA 操作程序 （单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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充分混匀，4℃24小时
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125I-ANP 100 100 100 100 100
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充分混匀，4℃24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀室温放置20分钟，3500 转/分 4℃ 离心20 分钟，去上清，测定沉淀cpm值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在
半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
1．本月每瓶标准品用 ml缓冲液稀释；
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记用 ml缓冲液稀释
本月PR试剂在使用前充分混匀（不可冰冻）。
2．测定兔标本时，应改用20%PEG 500ul/管 分离；同时，NSB、S0~S5管补加正常 人
血清100ul/管（或r-球蛋白100 ul/管），U0 、U管补加PBS 100ul/管。
本试剂盒主要技术参数：
NSB：<5%。
标准曲线范围：50~1600 pg/ml。
灵敏度：<25pg/ml。
精密度：批内CV7.7%,批间CV11.5% 。
特异性：本抗体与生长抑素，β-内啡肽及P-物质等多肽均无交叉反应。
正常参考值：100~250 pg/ml。
附注：
1、 本药盒有效期为一个月。
2、 标准品在使用前配制。
3、 用户如遇特殊情况，收到试剂盒后不能在有效期内使用，除标记品外，请您将标准品、抗血清冷冻保存，缓冲液、分离剂4℃保存，待下次只购一瓶标记即可。
4、 10%EDTA二钠室温保存，若出现沉淀，加热即可溶解
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2007-6-30
有效日期：2007-7-30
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