消脂素放免试剂盒操作说明书
Leptin (HY-10075) RIA KIT
消脂素(Leptin)是一种相对分子量约为16000 D的脂肪组织源激素,作为脂肪组织和中枢神经系统间网络联系的外周信号,可能通过血脑屏障作用于中枢神经系统。其生物学作用:影响摄食行为和调整自主系统活动,参与保持机体脂肪量恒定的自稳调节机制,其分泌呈昼间节律。目前有研究证明,胰岛素对消脂素浓度起决定的调节作用,直接抑制皮质醇释放,并具有刺激产热、氧耗和减轻体重的作用,并与甲状腺轴有互动作用。Leptin增加,可导致T3水平增加和T4水平降低。有学者观察到,哺乳期妇女的Leptin降低而怀孕期水平升高,表明:生殖系统激素很可能参与Leptin的体内生物合成的调节。
药盒主要应用范围:
* 肥胖症及Ⅱ型糖尿病的研究;
* 心血管疾病(冠状动脉硬化)、脑血管疾病(脑血栓、脑梗塞)的病理研究;
药盒组成:
1、Leptin标准品(冻干品)7瓶 :0、A、B、C、D、E、F,每瓶加2ml生理盐水溶解,其对应浓度分别为:0、1.25、2.5、5、10、20、40ng/ml。(标准品溶解后分装,保存在-20℃,避免反复冻融)。
2、125I-LEP标记物:1瓶,冻干品。
3、LEP抗体:1瓶,冻干品。(兰色,兔)
4、缓冲液:1瓶,溶液。
5、二抗分离剂:1瓶,溶液,使用前必须充分摇匀。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
测定方法:
Leptin RIA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 300 —— —— ——
标 准 液 —— —— 200 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
25I -Leptin 100 100 100 100 100
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充分混匀, 2~8℃ 温育20小时以上
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 离心20分钟,去上清,测沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月药盒标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。
本试剂盒主要技术参数:
NSB:≤7%
零管结合率(B0/T):≥20%。
标准曲线范围:0.3~110ng/ml
灵敏度:0.15ng/ml
精密度:批内CV≤10%,批间CV≤15% 。
准确性:回收率是90~110%
正常参考值:仅供参考,请各实验室建立自己的正常值.
空腹血清的正常参考值为:
男性:3.21~10.69 ng/ml
范围:1.45~15.19 ng/ml
女性: 9.79~21.09ng/ml
范围:6.00~29.63 ng/ml
生产日期:
有效日期:
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