分泌型IgA放射免疫分析试剂盒说明书
S IgA (HY-10094) RIA KIT
S IgA(分泌型免疫球蛋白)广泛存在于人体血液及各种分泌液,它是分泌液中主要免疫蛋白种,是机体粘膜特异性的防御因素,本试剂盒采用双抗体夹心法,检测血清及各种分泌液中的S IgA。采用的双抗体均是针对S IgA中分泌成分SC的特异抗体。具有特异性极强、灵敏性高、稳定性好的特点。首先包被在聚乙烯球上的抗体与样品中的S IgA形成免疫复合物“抗体- S IgA”,然后加入标记抗体125I-抗体,形成三层夹心免疫复合物“抗体S IgA-125-抗体。测定各小球上的125ICPM值与标准曲线或标准值CPM对照算,就可知样品中S IgA含量。
标本采集:取晨空腹的静脉血,离心,取血清,备检或放-25℃保存。
药盒组成:
1、SIgA标准品6瓶:0.15、0.40、0.80、1.60、3.20、6.40ug/ml。
2、SIgA标记1瓶(红色冻干品)。
3、SigA抗体1瓶(蓝色溶液)。
4、NSB(非特异)1瓶(白色冻干品)。
5、第二抗体1瓶(白色冻干品)
6、PEG1瓶(无色溶液)。
以上试剂均在2~8℃下保存
样本处理:样品可根据不同含量进行稀释
1、一般尿液原液、唾液1:100稀释。
2、前列腺液和泪液1:400稀释。
3、胃液和脑脊液以原液或1:10稀释。
4、粪便用生理盐水1:10(W / W)后1:100 (V / V)稀释,粘稠样品须适当处理(冻融离
心或超声波处理)
测定方法:
SIgA IRMA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
NSB —— 100 —— —— ——
样 品 —— —— —— 100 ——
标 记 物 100 100 100 100 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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充分混匀,37℃温育1.5小时。
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第二抗体 —— 100 100 100 100
PEG —— 100 100 100 100
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充分摇匀,37℃下放置0.5小时后,3500转/分离心15分钟,弃上清液,测沉淀和T
管放射性计数
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果.
注意事项:
本月药盒标记每瓶用 11.0 ml缓冲液稀释
本月药盒标准品(包括NSE)每瓶用 1.0 ml蒸馏水稀释
第二抗体每瓶用 10.0 ml生理盐水稀释
技术指标:
1、灵敏度:0.12ug/ml
2、特异性:抗体(免抗)与IgG、白蛋白未测出交叉反应
3、非特异结合率:≤6%
4、零管结合率>35%
5、标准曲线ED25:2.3ug/ml; ED50:0.71ug/ml; ED75:0.22ug/ml(供参考),相关
系数绝对值>0.9900。
正常参考值:各实验室最好建立自己的正常值。
晨 尿:1.84±0.96ug/ml
随 意 尿:1.62±0.88ug/ml
唾 液:206.4±117.9ug/ml
泪 液:1.028±0.561mg/ml
注意事项:
1、药盒于2~8℃保存。
2、样品可稀释后在4℃保存(密封)2周,超过2周应冷冻保存。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S 6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
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