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促红细胞生成素放免药盒操作说明书
EPOHY-10095 RIA  KIT
 
     促红细胞生成(Erythropoietin  EPO)由193个氨基酸组成,分子量为34000D糖蛋白。胎儿几乎均由肝脏产生,成人主要产生于肾脏近曲小管细胞和肾皮质、外层髓质的小管周围毛细内皮细胞。正常状态下肝脏分泌量占10~15%。EPO在肾脏、肝脏不能储存,当机体需要量增加时,只能依赖其合成增加。影响EPO生物合成的主要因素是机体的供氧情况:当过度输血或自发性红细胞生成增多等引起供氧增加时,血清EPO水平下降;而动脉血氧分压降低或红细胞数量减少造成缺氧时,则可使EPO的合成迅速增多。EPO生物学作用:增加原始、早幼、中幼阶段红细胞,降低骨髓转化时间,使发育的前期红细胞数目、网织红细胞数目增加,并使血小板增加,并刺激多能造血干细胞。最近研究证明:EPO与TPO(血小板生成素Thrombopoietin  TPO)有协同作用,共同维持机体生理功能。根据免疫竞争原理,用非平衡法建立了直接检测血清EPO水平的放射免疫分析方法。   
该药盒主要应用范围:
    * 血液病的研究
   * 肾病尤其是肾性贫血的研究、肾移植成活的监测
   * 血液流变学的研究
   * EPO治疗前后的血药浓度观察及疗效监测。
试剂盒组成:
        1、EPO标记一瓶;                  2、EPO抗体一瓶;         
   3、EPO标准品六瓶:0、5、12、60、160、320mIU/ml;
        4、缓冲液一瓶,去激素血清一瓶 ;    5、分离剂(第二抗体)一瓶。
标本收集:空腹抽静脉血2ml  离心取血清-20℃保存三个月。
测定方法:
                      EPO  RIA  操作程序(单位:ul)
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB     S0     S1~S5    样  品
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               缓 冲 液    ——    300    ——     ——     ——
               O 标 准     ——    ——    200     ——     ——
               标 准 品    ——    ——    ——     200     ——
               样    品    ——    ——    ——    ——      200
               抗    体    ——    ——    100      100      100
            ————————————————————————————
                               摇匀室温放置2小时                   
            ————————————————————————————
               125I- EPO    100      100     100    100      100
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                                摇匀4℃ 放置24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂     ——   500     500    500      500
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      混匀,室温放置30分钟后,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm值。
 
结果计算
    以N/T、B/T计算NSB,S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
      本月药盒抗体每瓶用     10        ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用     10        ml缓冲液稀释
  本月标准品每瓶用    ---------       ml去激素血清稀释      
“O”标准不稀释
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
正常参考值:13.1±5.45mIU/ml(n=50)
本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0              S1        S2         S3        S4        S5     
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
    N/T%     3.8   B0/T%  47. 15    B/ B0 %    98.05     87.26    77.06    61.13    46.59
    —————————————————————————————————————————
              
      生产日期: 2007-4-29
      有效日期: 2007-5-31
    
 
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