P物质放免试剂盒操作说明书
S.P（HY-10171）RIA KIT
P物质（S.P）为脑肠肽，分子量为1347，广泛分布于神经系统和胃肠系统，由APUD系统的EC1肠嗜铬细胞分泌。S.P具有多种生理功能，能够刺激和加速胃肠蠕动，刺激唾液和胰腺分泌，减少胆汁分泌，刺激生长抑素、胰岛素和高糖素的释放，同时，S.P还具有神经递质和调制因子的作用。本测定盒用于血浆提取液、组织提取液，脑脊液中S.P含量的测定。
盒组成及配制：冻干品于-20℃保存，溶解后允许冻融一次。液体试剂4℃保存。
1、缓冲液1瓶。
2、免疫沉淀剂（第二抗体）1瓶。
3、生理盐水（含0.5% BSA）：自备。
4、抑肽酶1瓶 10%EDTA-Na2，自备。
5、标准品2瓶:1024pg/瓶，用前加缓冲液 1 ml/瓶溶解，然后倍比稀释成浓度
为1024、25 6、128、64、32、16、8pg/ml的标准。
6、S.P抗体 2瓶。
7、125I - S.P 2 瓶。
8、牛血清白蛋白0.5克。
样品收集：
静脉血3ml ，注入含0.5M EDTA-Na2 30ul和抑肽酶1500 KIU试管中 混匀，
离心血浆放-20℃保存，测前提取或提取后再置-20℃贮存。
血浆提取：
每1ml血浆加2ml 冷丙酮（4℃±），混匀，4℃离心，2000转×20分钟。取
上清加4ml冷石油醚，混匀后再次离心。吸弃上相，下相用凉风（空调或电扇）将残
余丙酮吹掉后所余液体用冷冻抽干机抽干。亦可用氮气或多头吹干器吹干。干燥后密
封保存（4℃可存一周，-20℃可保存2—3月）提取管（瓶）不能用塑料管（瓶）！！！。
组织的提取：
取大小适宜的组织快，立即称重于煮沸的生理盐水（1ml）中煮沸3 分再加1N冰
醋酸0.5ml于匀浆器中匀浆提取，再用1N NaOH 0.5 ml中和，3000转/分，15分钟（最
好是低温离心）。取上清液贮存于-20℃以下待测，可保存2-3个月）。
注意事项：
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液/瓶稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液/瓶稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
操作步骤：提取冻干的血浆样品加生理盐水（含0.5% BSA ）0.5ml溶解。
S.P RIA加液程序 （单位：ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1 ~ S8 待测样本
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标 准 品 —— —— —— 100 ——
待测样本 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
缓 冲 液 —— 300 200 100 ——
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充分混匀，4℃ 放置24小时
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125I- S.P 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，离心 3000转/分 15分钟，弃上清，测定各管沉淀cpm数。
结果计算：
1． 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。以各标准管B/B0%与各标准管浓度的对数绘制曲线图，在图上查出各标本及回收管含量。
2． 血浆样本测值÷4=待测血浆样本的 S.P含量（pg/ml）（“4”为容积校正系数）
组织样本测值÷2=待测组织提取液S.P含量（pg/ml）。
3． 正常值：42.97±7.7 pg/ml。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：
有效日期；
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