促肾上腺皮质素释放激素放免药盒说明书
CRH（HY-10175） RIA KIT
促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）由下丘脑神经元合成，能刺激垂体促肾上腺皮质细胞前阿黑皮素原基因的表达和促肾上腺皮质激素及其相关肽的合成与释放。CRH不仅在脑内分布广泛，且人胎盘组织、羊膜、绒毛膜和蜕膜、大鼠胸腺和脾脏乃至植物血凝素刺激的人T淋巴细胞都可合成与分泌。人CRH与大鼠CRH完全同源，都为41肽，与羊CRH有7个氨基酸残基不同。
试剂盒组成与配制：
1、CRH标准品6瓶，其浓度分别为0、1.5、5.0、15.0、45.0、135.0ng/ml。
2、125I-CRH 1 瓶。
3、CRH抗体 1 瓶。
4、缓冲液 一瓶。
5、分离剂(第二抗体)一瓶。
样本收集和提取：
1、 静脉血3ml，注入含0.5M EDTA-Na230ul的试管中，混匀，离心，取血浆测定。
如贮于－20℃2-3月内测定不影响结果。
2、 组织的提取：取大小适宜的组织块，立即称重后于煮沸的生理盐水（1ml）中煮
沸3分钟，再加1Ｎ冰醋酸0.5ml 于匀浆器中匀浆提取,再用1ＮNaOH 0.5ml中
和，离心3000转/分，30分钟(最好是低温离心)。取上清液贮存于－20℃以下
待测样本 可保留2-3个月。
测定操作步骤：
CRH RIA 操作程序 加样单位:ul
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试 剂 T NSB B0 S1-S8 标 本
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缓 冲 液 —— 200 —— —— ——
零 标准 —— —— 100 —— ——
标 准 液 —— —— —— 100 ——
标 本 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-CRH 100 100 100 100 100
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混匀，4℃ 放置24小时
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分 离 剂 500 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟，3500转/分离心15分钟。弃上清，测沉淀计数(cpm)。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，
在半 对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
1、本月标准品每瓶用 0.8 ml缓冲液稀释
2、本月药盒抗体每瓶用 5.0 ml缓冲液稀释
3、本月药盒标记每瓶用 5.5 ml缓冲液稀释
药盒的技术指标：
1、灵敏度:≤ 3Pg/ml。
2、重复性:批内cv< 8％,批间cv<12％。
3、回收率:平均回收率 88％。
4、正常参考值：5.1±2.1 ng/ml
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 2.1 B0/T% 35 B/ B0 % 94 82 65 38 19
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生产日期：2007年05月26日
有效日期；2007年06月30日
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