促生长激素释放激素放免药盒说明书
GHRH（HY-10036） RIA KIT
促生长激素释放激素（GHRH）由下丘脑弓状核神经元合成并释放入垂体门脉系统后，与垂体生长激素细胞表面的生长激素释放激素受体（GHRHR）结合后,活化非选择性离子通道,使细胞膜去极化,促进钙离子内流和GH分泌. 本药盒利用人血清中样品GHRH与其示踪物125I-GHRH与特异性GHRH抗体竞争结合反应，形成125I-GHRH-GHRHAb; GHRH-GHRHAb复合物，加入（IgG）分离剂。利用分离剂分离出复合物，并测定复合物中的放射性计数。通过数据处理求出样品中GHRH的浓度。本药盒为定性测定，用血量少，直接加样，操作简便，快速。
试剂盒组成与配制：
1、GHRH标准品5瓶，其浓度分别为10.00、20.00、40.00、80.00、160.00ng/ml。
2、125I-GHRH 1 瓶。
3、GHRH抗体 1 瓶。
4、缓冲液 一瓶。
5、分离剂(第二抗体)一瓶。
样本收集和提取：
1、静脉血3ml，注入含0.5M EDTA-Na230ul的试管中，混匀，离心，取血浆测定。
如贮于－20℃2-3月内测定不影响结果。
2、组织的提取：取大小适宜的组织块，立即称重后于煮沸的生理盐水（1ml）中煮
沸3分钟，再加1Ｎ冰醋酸0.5ml 于匀浆器中匀浆提取,再用1ＮNaOH 0.5ml中
和，离心3000转/分，30分钟(最好是低温离心)。取上清液贮存于－20℃以下
待测样本 可保留2-3个月。
测定操作步骤：
GHRH RIA 操作程序 加样单位:ul
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试 剂 T NSB B0 S1-S8 标 本
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缓 冲 液 —— 200 —— —— ——
零 标准 —— —— 100 —— ——
标 准 液 —— —— —— 100 ——
标 本 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-GHRH 100 100 100 100 100
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混匀，4℃ 放置24小时
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分 离 剂 500 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟，3500转/分离心15分钟。弃上清，测沉淀计数(cpm)。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，
在半 对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
1、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
2、本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
3、本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
药盒的技术指标：
1、灵敏度:≤ 3Pg/ml。
2、重复性:批内cv< 8％,批间cv<12％。
3、回收率:平均回收率 88％。
4、正常参考值：36.33±12.1 ng/ml
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 2.0 B0/T% 47 B/ B0 % 92 84 67 43 22
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生产日期：
有效日期；
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