天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒使用说明书
Aspartate Aminotransferase Kit(AST/GOT)
连续监测法(2∶1)全自动型(液体)
适用于日立(HITACHI)系列和奥林帕斯(OLYMPUS)系列的全自动生化分析仪
7170型:R1 60ml×4 R2 60ml×2 7150,7060型:R1 80ml×4 R2 80ml×2
用途:
本试剂用于测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的酶活浓度。
测定原理:
AST
L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸-------- 草酰乙酸+L-谷氨酸
MDH
草酰乙酸+NADH+H+ --------- L-苹果酸+NAD++H2O
试剂盒主要成分与浓度:
试 剂 |
主 要 成 分 |
实验浓度 |
R1 |
NADH
苹果酸脱氢酶 (MDH)
乳酸脱氢酶(LDH) |
0.18mmol/L
≥1000U/L
≥5000U/L |
R2 |
L-天门冬氨酸
α-酮戊二酸 |
240mmol/L
12mmol/L |
试剂稳定性:
原装试剂在2~8℃避光保存,有效期12个月。
样品:
新鲜无溶血血清、肝素血浆或EDTA血浆。
操作步骤:
波长;340nm 温度:37℃ 比色杯光径:1cm
试剂开瓶即可使用
|
空白管 |
样品管 |
样 品 |
— |
30μl |
蒸馏水 |
30μl |
— |
R1 |
500μl |
500μl |
混匀,保温5分钟 |
R2 |
250μl |
250μl |
混匀,保温1分钟,准确测定1分钟吸光度变化 |
计算:
AST(U/L) = (△A样品/分-△A空白/分)×F
Vt
F = -------------- ×1000 = 4127
Vs×消光系数
Vt = 反应总体积 Vs = 样品体积
NADH在340nm波长下毫克分子消光系数 = 6.3
参考值:
男:≤37U/L
女:≤31U/L
参考文献:
1.Wallnöfer H,Schmidt E,Schmidt F W(ed). Synop-
sis der Leberkrankheiten.Stuttgart:Georg Thie-
me Verlag,1974
2.Thefeld W,et al.Dtsch Med Wschr,1974;99:343
各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。
线性上限:
AST活力可达800U/L
注意事项:
1.当△A/分大于0.190时,样品用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2.试剂空白吸光度小于1.000时,勿用。
3.本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
4.本产品应在2~8℃条件下贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
参考文献:
J clin chem clin Biochem,1986;24:497~508