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天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒使用说明书
Aspartate Aminotransferase Kit(AST/GOT)
连续监测法(2∶1)全自动型(液体)
           适用于日立(HITACHI)系列和奥林帕斯(OLYMPUS)系列的全自动生化分析仪
           7170型:R1 60ml×4  R2 60ml×2  7150,7060型:R1 80ml×4  R2 80ml×2

用途:
本试剂用于测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的酶活浓度。
测定原理:
                                      AST
L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸-------- 草酰乙酸+L-谷氨酸
                                  MDH
草酰乙酸+NADH+H+ --------- L-苹果酸+NAD++H2O    
试剂盒主要成分与浓度:
试 剂
主 要 成 分
实验浓度
R1
NADH
苹果酸脱氢酶 (MDH)
乳酸脱氢酶(LDH)
0.18mmol/L
≥1000U/L
≥5000U/L
R2
L-天门冬氨酸
α-酮戊二酸
240mmol/L
12mmol/L
试剂稳定性:
原装试剂在2~8℃避光保存,有效期12个月。
样品:
新鲜无溶血血清、肝素血浆或EDTA血浆。
操作步骤:
波长;340nm   温度:37℃  比色杯光径:1cm
试剂开瓶即可使用
 
空白管
样品管
样  品
30μl
蒸馏水
30μl
R1
500μl
500μl
混匀,保温5分钟
R2
250μl
250μl
混匀,保温1分钟,准确测定1分钟吸光度变化
计算:
AST(U/L) = (△A样品/分-△A空白/分)×  
            Vt
F = --------------  ×1000 = 4127
     Vs×消光系数
Vt = 反应总体积    Vs = 样品体积
NADH在340nm波长下毫克分子消光系数 = 6.3
参考值:
男:≤37U/L
女:≤31U/L
参考文献:
1.Wallnöfer H,Schmidt E,Schmidt F W(ed). Synop-
sis der Leberkrankheiten.Stuttgart:Georg Thie-
me Verlag,1974
2.Thefeld W,et al.Dtsch Med Wschr,1974;99:343
各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。
线性上限:
AST活力可达800U/L
注意事项:
1.当△A/分大于0.190时,样品用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2.试剂空白吸光度小于1.000时,勿用。
3.本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
4.本产品应在2~8℃条件下贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
参考文献:
J clin chem clin Biochem,1986;24:497~508
   
 
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