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肌酸激酶试剂盒使用说明书
Creatine Kinase Kit(CK)
 连续监测法(N-乙酰半胱氨酸法)通用型(干粉)
      适用于全自动、半自动生化分析仪及分光光度计
       包装规格:10ml×10
用途:
本试剂用于测定人血清中肌酸激酶的酶活浓度。
测定原理:
                       CK
磷酸肌酸+ADP ------  肌酸+ATP
                       HK
ATP+葡萄糖 ----------   葡萄糖-6-磷酸+ADP
                                   G6PDH
葡萄糖-6-磷酸+NADP-----------  6 -磷酸-葡萄糖酸+NADPH+H+
试剂盒主要成分与浓度:
 
试剂
主 要 成 分
实验浓度
R1
己糖激酶(HK)
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)
ADP
AMP
Ap5A
NADP
NAC
磷酸肌酸
≥3000U/L
≥2000U/L
 
2mmol/L
5mmol/L
10μmol/L
2mmol/L
20mmol/L
30mmol/L
R2
咪唑缓冲液(pH6.7 25℃)
葡萄糖
100mmol/L
20mmol/L
试剂稳定性:
原装试剂在2~8℃避光保存,有效期12个月。复溶后在2~8℃可稳定7天,在15~25℃可稳定12小时。
样品:
血清,肝素血浆或EDTA血浆。
操作步骤:
波长:340nm
反应温度:25℃,30℃,37℃
比色杯光径:1cm
取一定量R2(参看R1瓶签)复溶1瓶R1,溶解后即为工作液。工作液预先保温至测试温度。
 
空白管
样品管
25℃,30℃
37℃
25℃,30℃
37℃
工作液
2.50ml
2.50ml
2.50ml
2.50ml
蒸馏水
0.10ml
0.05ml
 样  品
0.10ml
0.05ml
混合均匀,在25℃保温3分30秒,或在30℃温育2分30秒,或在37℃温育2分钟后,读取初始吸光度,然后在精确1分钟,2分钟,3分钟时分别读取
吸光度,确定每分钟平均吸光度变化A

计算:

CK(U/L) = (△A样品/分-△A空白/分)×F    
             Vt                               4127(25℃或30℃)
F =----------------    ×1000=
      Vs×消光系数                       8095(37℃)
Vt = 反应总体积    Vs = 样品体积
NADPH在340nm波长下毫克分子消光系数=6.3
参考值:
 
25℃
30℃
37℃
10~80U/L
15~130U/L
24~195U/L
10~70U/L
15~110U/L
24~170U/L
参考文献:
1.Chemnitz G, et al. Dtsch Med Wschr,1979, 104:
257
2.Szasz G, E W Busch. Paper presented at 3rd Eur Congr Clin Chem,Brighton/England, June 3~8
(abstract),1979
各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。
线性上限:
CK活力可达1500U/L(37℃)
注意事项:
1. 当△A/分大于0.360(F=4127),0.190 (F=8095)时,样品用生理盐水稀释后重新测定,结果乘稀释倍数。
2. 试剂空白吸光度大于0.6时,勿用。
3. 血清中CK不稳定,样品收集后要尽快分析,在室温4小时,在4℃ 8~12小时后,CK活性即要下降。
4. 若试剂在全自动生化仪上使用,可参照本公司提供的相应型号仪器的参数,在公司技术人员指导下使用。
5. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
6. 本产品应在2~8℃条件下贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
 
 
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