用途：
本试剂用于测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶的酶活浓度。
测定原理：
α-HBDH
α-酮丁酸 + NADH + H+ α-羟丁酸 + NAD+
试剂盒主要成分与浓度：
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试剂 |
主 要 成 分 |
实验浓度 |
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R1 |
NADH |
0.18mmol/L |
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R2 |
酮丁酸
磷酸缓冲液 (pH7.5) |
3.3mmol/L
50mmol/L |
试剂稳定性：
原装试剂在2~8℃避光保存，有效期12个月。
复溶后在2~8℃避光保存可稳定72小时，在15~25℃可稳定8小时。
样品：
新鲜无溶血血清、肝素血浆或EDTA血浆。
操作步骤：
波长；340nm
温度：25℃，30℃，37℃
比色杯光径：1cm
取一定量R2（参看R1瓶签）复溶1瓶R1,溶解后即为工作液。工作液预先保温至测试温度。
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空白管 |
样品管 |
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工作液 |
1.00ml |
1.00ml |
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蒸馏水 |
0.02ml |
— |
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样 品 |
— |
0.02ml |
混合均匀，在反应温度保温30秒，读取初始吸光度，同时开始计时，在精确1，2，3分钟时，分别读取吸光度，确定每分钟平均吸光度变化（△A/分）。
计算：
α-HBDH(U/L) = (△A样品/分－△A空白/分)×F
Vt
F = ×1000 = 8095
Vs×消光系数
Vt = 反应总体积 Vs = 样品体积
NADH在340nm波长下毫克分子消光系数 = 6.3
参考值：
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25℃ |
30℃ |
37℃ |
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U/L |
55~140 |
65~165 |
72~182 |
参考文献：
Elliott B A,et al.Clin.Sci,1963,24:343
各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。
线性上限：
α-HBDH活力可达1000U/L（37℃）
注意事项：
1.当△A/分大于0.130时，应取0.1ml样品加0.3ml生理盐水稀释，再重新测定，结果乘以4。
2.试剂空白吸光度小于1.000时，勿用。
3.若试剂在全自动生化仪上使用，可参照本公司提供的相应型号仪器的参数，在公司技术人员的指导下使用。
4.本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。
5.本产品应在2~8℃条件下贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
参考文献：
Fred Y,Leung:Clinica Chimica Acta,1981,115: 145~153
