产品标准：

本试剂为即用型

产品应用：

适用于进行免疫染色后的复染

产品介绍：

             使用说明书
            产品简介
    组织学和病理学标本的染色方法很多，但最基本的染色方法是苏木精-伊红染色。该方法可将细胞核染成蓝紫色，细胞质染成粉红色，使细胞结构对比分明。
    苏木精(Hematoxylin)是从热带植物苏木中提取的一种色素，苏木精不能直接染色，必须暴露在空气中变成氧化苏木精（又叫苏木素）-“成熟”后才能使用。苏木精的“成熟”需时较长，配制后时间愈久，染色力愈强。苏木素中带正电荷的色精可吸附在细胞核中带负电荷的核酸成份上而将细胞核染成蓝紫色。伊红是带负电荷的酸性染料，使细胞浆呈现粉红色或红色。
    采用苏木素-伊红染色试剂盒(Hematoxylin-Eosin Staining Kit)进行免疫染色后的复染，操作步骤简便，操作时间短。可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色，或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用。使用苏木素-伊红染色试剂盒染色后，也可以进行免疫染色或其它染料的复染。染色后的细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。
    染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。
             保存条件
    室温保存，至少一年有效。

                                      使用说明
    1. 样品处理
    a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟，换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟，无水乙醇5分钟，90%乙醇2分钟，70%乙醇2分钟，蒸馏水2分钟。
    b) 对于冰冻切片：经固定的切片置蒸馏水2分钟。
    c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上，蒸馏水洗涤2分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。
    2. 苏木素-伊红染色
    a) 对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10分钟（可以根据染色结果和要求调整时间），回收染色液后，用自来水冲洗去除残留的染色液，
    b) 蓝化和分色：用自来水冲洗，待切片变成蓝色后，再用含0.5～1％盐酸的70％酒精溶液进行分色，脱去多余的染料（因为苏木精染色后，细胞核着色较深，细胞质及结缔组织纤维等亦稍着色，影响下步染色及观察）。然后再用自来水冲洗，使之蓝化，需5～10分钟。
    c) 伊红染色：切片用蒸馏水浸洗后，放入1％伊红水溶液，浸染5～10分钟。
    d) 脱水：将切片用蒸馏水洗去附在载玻片上的染液后，经70％、80％、90％酒精分色及脱水，再经95％酒精和2次无水酒精脱水，每级一般为2分钟。
    e) 透明：切片入二甲苯2次，每次2分钟。
    f) 封固：从二甲苯中取出切片，在切片的组织上滴加适量树胶，上面再加一盖玻片，
使树胶布满于盖玻片与载玻片之间的间隙，封固即告完成。将封好的切片标本放入烤箱，待盖玻片粘着牢固后，即获得可供长期观察和保存的H·E染色标本。
    3. 进行其它染色
    如果进行免疫荧光染色，伊红染色液染色后，70％乙醇洗涤2次，每次2分钟，再用PBS或生理盐水、TBS、TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟，然后就可以进行免疫荧光染色或其它的染色。

                注意事项
    1.需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇、盐酸酒精。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇、无水乙醇以及二甲苯。
    2.染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。
    3.第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
    4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作