产品标准：40-60块SDS-PAGE凝胶/kit
产品应用：WB
产品介绍：
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
产品简介
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒规格：可制40-60块凝胶
保存: 10% SDS和TEMED (避光) 室温保存。30%丙烯酰胺混合液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8)4℃保存、过硫酸铵配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效。
本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Parparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶，也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。
本试剂盒可配制不同常规、不同聚合度的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶) 约40-60块。
包装清单
| |
|
| 30%丙烯酰胺混合液 |
100ml |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8) |
100ml |
|
1.0mol/L Tris(pH6.8) |
30ml |
|
10%过硫酸铵 |
5ml |
|
10% SDS |
5ml |
|
TEMED |
0.5ml |
|
说明书 |
一份 |
保存条件
保存: 10% SDS和TEMED (避光) 室温保存。30%丙烯酰胺混合液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8)4℃保存、过硫酸铵配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效。
使用说明：
1. 10%过硫酸铵为5ml，应分装置-20℃保存，通常半年内有效。
2. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
|
SDS-PAGE分离胶浓度 |
最佳分离范围 |
|
6%胶 |
57-212kD |
|
8%胶 |
36-94kD |
|
10%胶 |
20-80kD |
|
12%胶 |
12-60kD |
|
15%胶 |
10-43kD |
配制6%的PAGE分离胶
|
成分 |
所需各成分的体积(毫升) |
|
凝胶体积 |
5 |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
|
蒸馏水 |
2.6 |
5.3 |
7.9 |
10.6 |
13.2 |
15.9 |
|
30%丙烯酰胺混合液 |
1.0 |
2.0 |
3.0 |
4.0 |
5 |
6.0 |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8) |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
TEMED |
0.004 |
0.008 |
0.012 |
0.016 |
0.02 |
0.024 |
配制8%的PAGE分离胶
|
成分 |
所需各成分的体积(毫升) |
|
凝胶体积 |
5 |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
|
蒸馏水 |
2.3 |
4.6 |
6.9 |
9.3 |
11.5 |
13.9 |
|
30%丙烯酰胺混合液 |
1.3 |
2.7 |
4.0 |
5.3 |
6.7 |
8.0 |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8) |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
TEMED |
0.003 |
0.006 |
0.009 |
0.012 |
0.015 |
0.018 |
配制10%的PAGE分离胶
|
成分 |
所需各成分的体积(毫升) |
|
凝胶体积 |
5 |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
|
蒸馏水 |
1.9 |
4.0 |
5.9 |
7.9 |
9.9 |
11.9 |
|
30%丙烯酰胺混合液 |
1.7 |
3.3 |
5.0 |
6.7 |
8.3 |
10.0 |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8) |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
0.012 |
配制12%的PAGE分离胶
|
成分 |
所需各成分的体积(毫升) |
|
凝胶体积 |
5 |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
|
蒸馏水 |
1.6 |
3.3 |
4.9 |
6.6 |
8.2 |
9.9 |
|
30%丙烯酰胺混合液 |
2.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
10.0 |
12.0 |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8) |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.015 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.015 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
0.012 |
配制15%的PAGE分离胶
|
成分 |
所需各成分的体积(毫升) |
|
凝胶体积 |
5 |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
|
蒸馏水 |
1.1 |
2.3 |
3.4 |
4.6 |
5.7 |
6.9 |
|
30%丙烯酰胺混合液 |
2.5 |
5.0 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
15.0 |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8) |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
|
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.001 |
0.012 |
3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)
配制不同体积的浓缩胶
|
成分 |
所需各成分的体积(毫升) |
|
凝胶体积 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
8 |
|
蒸馏水 |
1.4 |
2.1 |
2.7 |
3.4 |
4.1 |
5.5 |
|
30%丙烯酰胺混合液 |
0.33 |
0.5 |
0.67 |
0.83 |
1.0 |
1.3 |
|
1.0mol/L Tris(pH6.8) |
0.25 |
0.38 |
0.5 |
0.63 |
0.75 |
1.0 |
|
10%SDS |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.05 |
0.06 |
0.08 |
|
10%过硫酸铵 |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.05 |
0.06 |
0.08 |
|
TEMED |
0.002 |
0.003 |
0.004 |
0.005 |
0.006 |
0.008 |
注意事项
10%过硫酸铵的水溶液不稳定,每次取用后应立即放回冰箱，尽量减少室温存放时间，以防失效。如发现凝胶聚合不好，应考虑丢弃使用过的10%过硫酸铵，更换新配制的10%过硫酸铵。
另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切，在其它条件不变的情况下，可通过改变TEMED的用量，控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作。操作中，特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
未聚合的丙烯酰胺有毒，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
|
