白细胞介素-12放免药盒操作说明书
IL-12(HY-10108)RIA KIT
白介素-12(Interleulin -12, IL-12)是一种细胞免疫反应有力的调节分子,它能强烈的诱导NK和T细胞产生IFN-r。它主要有激活的抗原递呈细胞产生。如单核巨噬细胞/DL细胞/B细胞等其生物素作用。1.促进NK细胞CD4、CD8的T细胞增殖和活化2.粗经产生IFN-r的TH1细胞的形成。3.对机体免疫应答反应,肿瘤免疫,及急性时相反应峰机体中发挥重要的作用。
药盒的组成及配制:
1、IL-12 标准品5瓶:浓度为5、10、20、40、80pg/ml。
2、125I- IL-12 2瓶。
3、抗体1瓶。
4、缓冲液 1瓶.
5、分离剂(第二抗体)1瓶。
6、标准品稀释液 1瓶。
样品收集:
取空腹静脉血2ml于试管中,凝固后分离血清,-20℃可保存二个月。
操作方法:
IL-12 RIA 操作表 单位:ul
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试 剂 T NSB S1~ S5 标本管
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缓 冲 液 —— 200 —— ——
标 准 品 —— —— 200 ——
标 本 —— —— 200 ——
抗 体 —— —— 100 100
标 记 100 100 100 100
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混匀, 4℃放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500
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混匀,室温放置20分钟,3500转/分 离心 15分钟,吸弃上清液,测沉淀cpm。
结果计算:
以N/T、B/T计算NBS、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,
在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由自动γ-计数器预先编制程序,直 接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml 标准品稀释液稀释 “0”标准品不用稀释直接使用
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。
技术指标:
NSB:<5%
灵敏度:<2 pg/ml
曲线范围:5-80 pg/ml
批內变异系数<6%
批间变异系数<10%
特异性:本血清与IL-2、IL-6、TNF-α无交叉反应,与C-CSF交叉反应<5%
正常参考值:
7-18pg/ml; 均值:11.29±4.58pg/ml
各实验室应根据自己的条件建立自己的正常值:
本月药盒参考数据:
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T NSB S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:2009-05-20
有效日期:2009-06-30
生产批号:20090520
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