肿瘤坏死因子-β放免试剂盒操作说明书
TNF-β(HY-170) RIA KIT
肿瘤坏死因子(Tunmor necros factor TNF)是一类能引起肿瘤组织出血坏死的细胞因子。1975年Garwell等将卡介苗注射给荷瘤小鼠,两周后再注射脂多糖,结果在小鼠血清中发现一种能使肿瘤发生出血坏死的物质,称为肿瘤坏死因子。肿瘤坏死因子分为TNF-αTNF-β两种,前者主要由脂多糖/卡介苗又称淋巴毒素。TNF-α/β为同源三聚体分子,主要生物学作用如下:HrP医家园(1)对肿瘤细胞和病毒感染细胞有生长抑制和细胞毒作用;HrP医家园(2)激活巨噬细胞、NK细胞,增强吞噬杀伤功能,间接发挥抗感染、抗肿瘤作用;HrP医家园(3)增强T、B细胞对抗原和有丝分裂原的增生反应,促进MHC-Ⅰ类分子表达,增强Tc细胞杀伤活性;HrP医(4)诱导血管内皮细胞表达粘附分子和分泌IL-1、IL-6、IL-8、CSF等细胞因子促进炎症反应发生;HrP医家园(5)直接作用或刺激巨噬细胞释放IL-1间接作用下丘脑体温调节中枢引起发热;HrP医家园
(6)引起代谢紊乱,重者出现恶病质。
HrP医家园
本药盒采用液相竞争法,标记TNF和待测样品中的TNF竞争性的与特异抗体结合,以PR试剂为分离剂,操作简便、准确性和灵敏度高。
标本的收集:取静脉血2ml于试管中,凝固分离血清,-20℃保存二个月
药盒组成:
1、TNF-β标记一瓶 (冻干品);
2、TNF-β抗体一瓶 (冻干品);
3、缓冲液一瓶,直接使用;
4、分离剂(第二抗体)一瓶,4℃保存,用前充分混匀。
5、TNF-β标准品五瓶:20、40、80、160、320pg/ml。稀释后的标准液放4℃保存仅供24小时使用。
测定方法:
TNF-β RIA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- TNF -β 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟, 3500转/分 离心15分钟,弃上清,测沉淀CPM。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对
数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读结果。
注意事项:
1、本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
2、本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
3、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释.
4、本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
正常参考值: 80-130 pg/ml
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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