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肿瘤坏死因子-β放免试剂盒操作说明书
TNF-βHY-170 RIA  KIT  
 肿瘤坏死因子(Tunmor  necros  factor  TNF)是一类能引起肿瘤组织出血坏死的细胞因子。1975年Garwell等将卡介苗注射给荷瘤小鼠,两周后再注射脂多糖,结果在小鼠血清中发现一种能使肿瘤发生出血坏死的物质,称为肿瘤坏死因子。肿瘤坏死因子分为TNF-αTNF-β两种,前者主要由脂多糖/卡介苗又称淋巴毒素。TNF-α/β为同源三聚体分子,主要生物学作用如下:HrP医家园(1)对肿瘤细胞和病毒感染细胞有生长抑制和细胞毒作用;HrP医家园(2)激活巨噬细胞、NK细胞,增强吞噬杀伤功能,间接发挥抗感染、抗肿瘤作用;HrP医家园(3)增强T、B细胞对抗原和有丝分裂原的增生反应,促进MHC-Ⅰ类分子表达,增强Tc细胞杀伤活性;HrP医(4)诱导血管内皮细胞表达粘附分子和分泌IL-1、IL-6、IL-8、CSF等细胞因子促进炎症反应发生;HrP医家园(5)直接作用或刺激巨噬细胞释放IL-1间接作用下丘脑体温调节中枢引起发热;HrP医家园
(6)引起代谢紊乱,重者出现恶病质。
HrP医家园
本药盒采用液相竞争法,标记TNF和待测样品中的TNF竞争性的与特异抗体结合,以PR试剂为分离剂,操作简便、准确性和灵敏度高。
 
标本的收集:取静脉血2ml于试管中,凝固分离血清,-20℃保存二个月
     药盒组成:
  1、TNF-β标记一瓶 (冻干品);
  2、TNF-β抗体一瓶 (冻干品);
3、缓冲液一瓶,直接使用;
  4、分离剂(第二抗体)一瓶,4℃保存,用前充分混匀。
  5、TNF-β标准品五瓶:20、40、80、160、320pg/ml。稀释后的标准液放4℃保存仅供24小时使用。
 
 测定方法:
                         TNF-β  RIA  操作程序        (单位:ul)
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB     S0    S1~S5    样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液    ——    200     100   ——      ——
               标 准 品    ——    ——   ——    100      ——
               样    品    ——    ——   ——   ——      100
               抗    体    ——    ——    100    100      100                        
               125I- TNF -β   100    100     100    100      100
            ————————————————————————————                   
                           摇匀4℃ 放置24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂    ——    500      500    500      500
            ————————————————————————————
        混匀,室温放置15分钟, 3500转/分 离心15分钟,弃上清,测沉淀CPM。
 
结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对
数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读结果。
  
注意事项:
 1、本月药盒抗体每瓶用      ml缓冲液稀释
2、本月药盒标记每瓶用      ml缓冲液稀释
3、本月标准品每瓶用          ml缓冲液稀释.
      4、本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
 
   正常参考值:  80-130 pg/ml
 
   本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————
            T       NSB      S0         S1        S2        S3         S      S5   
    ————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————
          N/T%   B0/T%        B/ B0 %       
—————————————————————————————————————
 
     
      生产日期:
      有效日期:
      生产批号:
 
 
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