科研药盒，慎用于临床               

           7-乙氧基异吩恶唑酮-O-脱乙基酶试剂盒说明书
                                    EROD（HY-50108）KIT
    细胞色素P4501A（Cytochrome P4501A，CYP4501A）是BaP 活化最重要的代谢酶, 可将BaP 和乙氧基异吩恶唑酮(ethoxyresorufin, ERF)羟化和脱乙基,即CYP4501A具有芳香烃羟化酶(AHH)和乙氧基异吩噁唑酮脱乙基酶（EROD）活力, 其中EROD 的反应具有代表
性。BaP 在化学性质上没有太大的活性,但经过生物体内多种代谢酶的作用活化后,可转化为化学性质活泼的化合物，从而对机体产生多种毒害作用，引起E R O D 活性改变，高浓度的重金属对肝EROD 酶均有一定的抑制作用，其中Hg2+,Cd 2+的抑制性更明显。因此EROD 酶作为监测化学物致癌潜力，也是评价环境污染状况最灵敏的生物标志物之一，广泛应用于环境监测。
试剂盒组成：
试剂1：NADPH干粉一瓶            试剂4：二甲亚砜溶液一瓶
试剂2：7-ethoxyresomfin一瓶       试剂5：缓冲液一瓶
试剂3：甲醇溶液一瓶               试剂6：终止液一瓶

标本收集：取新鲜组织标本（30mg为宜）
标本处理：将取称重后的组织标本，用缓冲液(100 mmol／L Tfis-C1，100 mmol／L NaCl，pH 7．4)1：20(w／v)混合进行匀浆。
操作方法：将已配好的组织匀浆液10000 转／分，20 min，4℃离心，取上清液(酶制剂)待用。取已匀浆好的标本15 ul，加2．5 mmol／L NADPH(现配)15ul，底物7-ethoxyresomfin 40 umol／L(溶于体积比为1：1的甲醇：二甲亚砜后再用水稀释)3．75ul，缓冲液(100 mmol／L Tris-Cl，100 mmol／L Nacl，pH 7．8)116．25ul，于25℃保温30 min后，以1 mol／L NaOH37．5ul阻终止反应。激发波长530 nm，发射波长590 nm，用荧光分光光度计测荧光值。酶活力单位用每g蛋白产生的Resorufln的nmol数表示。
结果计算：
用荧光分光光度计测荧光值。酶活力单位用每g蛋白产生的Resorufln的nmol数表示。
正常参考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考： <5 nmol／min mg
注意事项：
1. 本法在室温（22-25℃）内完成。
2. 本产品仅用于体外诊断，避免直接接触皮   肤和眼睛，切勿吞咽。
3. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本实验回收系数：96.7%~99.43%
变异系数：      0.73%~2.06%

生产日期：
有效日期：

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