基质金属蛋白酶13放免试剂盒说明书

                                 MMP-13（HY-10206） RIA  KIT
      基质金属蛋白酶13（MMP-13，Matrix metalloproteinases-13）最早是从人的乳腺癌组织中克隆得到，是一种分子量为60KD的糖蛋白，具有强大的蛋白水解酶活性，但可作用的底物广泛，几乎囊括细胞外基质的所有蛋白成分。MMP-13在细胞外间质重塑过程中居核心地位。它不仅可以直接降解细胞外间质，还可以通过活性其它MMP家族成员发挥作用。生理状态下MMP-13表达仅限于骨骼系统的重塑过程中，但是MMP-13在各种肿瘤细胞中均有表达，特别是在乳腺癌细胞和软骨肉瘤细胞中。相对于其它MMP家族成员，MMP-13表达具有一种限制性的特点。MMP-13蛋白的过表达属于病理状态且与肿瘤细胞的生长、浸润和侵袭密切相关。
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
 
  该药盒主要应用范围：
*乳腺癌
*各种肿瘤疾病         
  药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． MMP-13缓冲液1瓶
2． MMP-13（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． MMP-13标准品5瓶，浓度为1.25、2.5、5、10、20、40、80 ug/mL
4． MMP-13抗体 1瓶。
5． 125I –MMP-13 1瓶  
 
 测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
                       MMP-13  RIA加液程序    （单位： ul ）
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              试   剂      T     NSB      S0     S1~S5      样  品
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              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
              125I- MMP-13   100     100     100     100       100
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                             摇匀4℃ 放置24小时
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              分 离 剂    ——   500      500     500       500
   
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。 

结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：  
      本月标准品每瓶用           ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用         ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用         ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
   本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<0.25 ug/ml。
3、 标准曲线范围：1.25-80ug/ml
4、 批内变异系数：CVw<7.3%；
      批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：7±3ug/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                
     本月药盒参考数据：
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           T       NSB       S0           S1        S2          S3         S4         S5    
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    CPM
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             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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