本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 核糖体蛋白S6激酶1放免试剂盒说明书 S6K1(HY-10224) RIA KIT 核糖体蛋白S6激酶 (ribosomal protein S6 kinases,S6K)是一类具有可以调控核糖体蛋白S6合成的生理性激酶, 通过促进编码核糖体蛋白mRNA 的翻译, 加速核糖体蛋白合成, 以生成更多的核糖体, 从而使蛋白质合成增加, 以加速细胞生长. 当S6K 基因突变或表达不足时, 动物个体变小。脊椎动物细胞表达两种形式的S6K(S6K1 和S6K2), 它虽然编码两种不同的基因, 但具有较高的同源性. 脊椎动物40S核糖体蛋白S6 激酶(p70 S6 激酶, 又称为S6K1)可调控细胞或器官尺寸,并且S6K1 是个体尺寸调控的主效应基因. S6K1 5′ 端(外显子1 及近邻序列)对细胞生长具有重要调控作用。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的S6K1和加入的125I –S6K1(标记的S6K1抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –S6K1(标记的S6K1抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的S6K1的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中S6K1的含量。 该药盒主要应用范围: 呼吸系统疾病 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. S6K1 缓冲液1瓶 2. S6K1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. S6K1标准品6瓶,浓度为5、10、20、40、80、160pg/ml 4. S6K1抗体 1瓶。 5. 125I –S6K1 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: S6K1 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-S6K1 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<6.7%。 2、 灵敏度:<0.5pg/ml 3、 标准曲线范围:5-160pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.6%; 批间变异系数:CVw <8.8% 。 5、 正常参考值:22pg/ml±8.1pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
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