本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
4-羟基壬烯酸放免试剂盒说明书
4-HNE(HY-10225) RIA KIT
4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal, HNE)是两个强毒力的脂质过氧化终产物之一,常常作为判断脂质过氧化的指标。HNE能够通蛋白结合形成稳定的、加合物状态的晚期脂质过氧化终产物,这种被HNE修饰的蛋白质在细胞内会进一步导致被氧化蛋白在功能和结构上的改变。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的4-HNE和加入的125I –4-HNE(标记的4-HNE抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –4-HNE(标记的4-HNE抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的4-HNE的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中4-HNE的含量。
该药盒主要应用范围:
呼吸系统疾病
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. 4-HNE 缓冲液1瓶
2. 4-HNE(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. 4-HNE标准品7瓶,浓度为1、2、4、8、16、32、64mg/L
4. 4-HNE抗体 1瓶。
5. 125I –4-HNE 1瓶
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
4-HNE RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-4-HNE 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5.3%。
2、 灵敏度:<0.1mg/L
3、 标准曲线范围:1-64mg/L
4、 批内变异系数:CVw<7.2%;
批间变异系数:CVw <8.6% 。
5、 正常参考值:6mg/L±2.1mg/L各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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