科研药盒,慎用于临床 二胺氧化酶试剂盒说明书 DAO(HY-60106) 二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)是人类和哺乳动物小肠粘膜上层绒毛中具有高度活性的细胞内酶,在组胺和多种多胺代谢中起作用,其活性与粘膜细胞的核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和损伤程度。
检测原理 DAO的测定原理是利用DAO催化丁二胺产生H2O2和NH3。NH3和α酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶作用下,生成谷氨酸,使反应体系中还原型辅酶I转变成NAD+,在340nm波长下测定NADH吸光度下降值,间接计算DAO活性。 GLDH
NH3 +α酮戊二酸+NADH+H+ --------- 谷氨酸+NAD+ +H2O
DAO H2N-R-CH2NH2+ H2O2 ---------- H2N-R-CHO+H2O2+ NH3
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NH3 +α酮戊二酸+NADH+ H+ ----------- 谷氨酸+NAD+ +H2O 试剂盒组成: 试剂1:缓冲液 1瓶 试剂2:反应液 1瓶 试剂3:基质液 1瓶 试剂2和试剂3,按4:1比例混合后直接进行检测
操作步骤: 二胺氧化酶操作步骤 单位(ul) ————————————————————————————————————— 对照管 标准管 样本 —————————————————————————————————————— 样本 —— —— 50 混合液 600 600 600 —————————————————————————————————————— 混匀 动态法 蒸馏水调零 用标准品定标 26.1(扩大10倍),波长340nm 读取OD值 直接半自动或全自动生化仪上读取结果;或者将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后在 分光光度计上读取OD值,将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。
计算结果 如果没有全自动生化仪或半自动生化仪,将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。(适用于分光光度计)结果 全自动或半自动生化仪直接读取数据,最终结果除以10.
正常参考值: 各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:2.61±1.44U/L 六、注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标: 1、线性范围:0-26.1U/L 2、精密度:批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 3、灵敏度:<0.5 U/L
浓度 (U/L) 46 23 11.5 5.75 2.875 OD值 8.87 5.09 3.14 1.76 1.13
生产日期:
有效日期:
生产批号:
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