本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 α-肌动蛋白放免试剂盒说明书 α-SMA(HY-10261) RIA KIT
α-肌动蛋白(alpha smooth muscle Actin,α-SMA)是一种具有收缩能力的微丝蛋白, 由375个氨基酸残基组成,单体肌动蛋白分子的分子量为43kDa。a-SMA广泛分布于几乎所有的肌型细胞中,如骨骼肌、心肌和平滑肌等,是细胞骨架的主要成分。它在心脏、骨骼横纹肌组织和某些平滑肌组织中广泛的表达,主要作用调节其收缩功能。临床研究表明肌动蛋白的功能失调也会导致某种类型的心脏病。肌动蛋白是标记平滑肌和肌上皮细胞肿瘤的有效工具。目前主要用于检测骨骼肌、平滑肌、血管平滑肌、心肌和肌原性肿瘤。物〔‘ 测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-a-SMA与抗体的结合量与标准或样品中的a-SMA的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中a-SMA的浓度值。 药盒应用: 肿瘤等疾病 运动功能的研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 缓冲液(PBS)1瓶。 2、 PR分离剂(第二抗体) 3、 a-SMA抗体1瓶:用前充分摇匀 4、125I- a-SMA标记 1瓶: 5、a-SMA标准品6瓶,浓度为2.5、5、10、20、40、80pg/ml
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: a-SMA RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- a-SMA 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1. NSB:8% 2. 灵敏度:<0.25pg/ml 3. 标准曲线范围:2.5~80pg/ml 4. 批内变异系数:CVw<8.4 %。 5. 批间变异系数:CVw < 7.5% 。 6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 10±3.11pg/ml(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号:
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