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                                                                                                  本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断
                                  基质金属蛋白酶1放免试剂盒说明书
                                                MMP-1(HY-10270) RIA  KIT
     基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase ;MMPs)家族已分离鉴别出26个成员,编号分别为MMP1~26。根据作用底物以及片断同源性,将MMPs分为6类,为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的MMP和其他分泌型MMP。MMP-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1),又称间质胶原酶-1,主要由心肌纤维细胞分泌,分解占细胞包基质90%的Ⅰ型和Ⅲ型胶原,是细胞外基质降解过程中重要的酶类。MMP-1对心脏起到重要的重构作用,MMP-1活性增加与心腔扩大及心肌重构有密切关系。MMP-1也可直接降解软骨基质中最具特征、含量也最多的Ⅱ型胶原。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的MMP-1和加入的125I –MMP-1(标记的MMP-1抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –MMP-1(标记的MMP-1抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的MMP-1的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中MMP-1的含量。
该药盒主要应用范围:
 心血管疾病
 呼吸系统疾病
 骨关节炎
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. MMP-1 缓冲液1瓶
2. MMP-1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. MMP-1标准品6瓶,浓度为1、2、4、8、16、32ng/ml
4. MMP-1抗体 1瓶。
5. 125I –MMP-1 1瓶  
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       MMP-1  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂         T     NSB      S0        S1~S5    样  品
           ————————————————————————————
               缓 冲 液   ——    200      100       ——      ——
               标 准 品   ——    ——      ——       100      ——
                样    品    ——    ——       ——      ——      100
                抗    体    ——    ——      100       100      100
       125I-MMP-1   100     100      100      100       100
           ————————————————————————————
                                    摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
             分 离 剂    ——    500       500      500       500
              ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
 
 结果计算
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用     0.5       ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用   10.5     ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用   10.5     ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
   本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<7%。
2、 灵敏度:<0.1ng/ml
3、 标准曲线范围:1-32ng/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.1%;
      批间变异系数:CVw <8.5% 。
5、 正常参考值:3.67ng/ml±1.12ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                
     本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
        T  NSB       S0     S1    S2    S3     S4      S5  
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
    —————————————————————————————————————————

      生产日期:
      有效日期:
      生产批号:
  

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