本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 多聚免疫球蛋白受体放免药盒操作说明书 pIgR(HY-10275) RIA KIT 多聚免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor , pIgR) 为免疫球蛋白超家族中的一员, 属于Ⅰ型跨膜糖蛋白, pIgR分为胞内区(即C末端)、胞外区(即N末端)和跨膜区3个部分,其中胞内区含有103个氨基酸,跨膜区含有23个氨基酸,胞外区含有620个氨基酸。pIgR的胞外区又称分泌成分,是分子量为80kD左右的糖蛋白,由549~558 个氨基酸和大约20 %糖组成。多聚免疫球蛋白受体可与多聚免疫球蛋白A和多聚免疫球蛋白M特异性结合,通过穿胞转运,将它们从上皮细胞基底侧膜转运到顶膜,并最终分泌到外分泌液中去。多聚免疫球蛋白受体的有效分泌在不同部位发挥防御功能,阻止病原体对上皮细胞的粘附和入侵,还具有在细胞内中和病毒等作用。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的PIGR和加入的125I –PIGR(标记的PIGR抗原)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –PIGR(标记的PIGR抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的PIGR的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中PIGR的含量。 该药盒主要应用范围: 粘膜免疫性的研究 癌症病情转移的研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. PIGR 缓冲液1瓶 2. PIGR(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. PIGR标准品5瓶,浓度为1、2、4、8、16pg/ml 4. PIGR抗体 1瓶。 5. 125I –PIGR 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: PIGR RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I-PIGR 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、NSB:<7%。 2、灵敏度:<0.1pg/ml 3、标准曲线范围:1-16pg/ml 4、批内变异系数:CVw<7.5%; 批间变异系数:CVw <9% 。 5、正常参考值:2.8±0.7pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ——————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ——————————————————————————————————— CPM ——————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ———————————————————————————————————
生产日期: 有效日期: 生产批号:
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