本药盒为科研药盒,慎用于临床诊断 表皮生长因子受体放射免疫分析操作说明书 EGFR (HY-H0029) RIA KIT 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor EGFR)是一种受体酪氨酸激酶,由1186个氨基酸残基的单一肽链组成,分子量为170KD,定位于细胞膜上。EGFR介导的信号转导与细胞增值、生存和分化的调节密切相关。本试剂盒采用125I – EGFR及血清中的EGFR与EGFR单克隆抗体,进行竞争性结合反应的放射免疫分析技术,应用免疫分离剂的分离方法,对血清中EGFR的含量进行检测。 药盒组成: 1. EGFR抗体(冻干品) 瓶。 2. 125I – EGFR 瓶。 EGFR标准品(冻干品)2瓶,取标准一瓶,加缓冲液1ml,其浓度:4000pmol/ml,然后 吸出0.5 ml加缓冲液0.5 ml进行对半稀释,使其浓度为4000、2000、1000、500、250、 100、50pmol/ml。 3. 免疫沉淀剂(第二抗体)1瓶。 4. 缓冲液一瓶。 样品处理: 血清及组织液可直接测定。 尿液处理:(1)收集二十四小时尿时加10ml甲苯做防腐剂,量取总量后取1ml于-20 ℃ 保存,2个月内测定。(2)收集随意尿,取1ml于-20 ℃保存,2个月内测定。同时测定尿肌 酐。以上尿液测定时用生理盐水稀释100倍,然后按说明书进行操作。随意尿的测值单位以EGF (pg)/肌酐/ml表示。 测定方法: h-EGFr RIA 操作程序 (单位:ul) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品 ———————————————————————————— 蒸 馏 水 —— 200 —— —— —— 标 准 液 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I - EGFr 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 充分混匀, 4℃ 放置24~48小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm值。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项: 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。 本试剂盒主要技术参数: NSB:<5% 标准曲线范围:50~4000pmol/ml 灵敏度:0.1ug/L 精密度:批内CV<5%,批间CV<10% 。
正常参考值: EGFR含量:160p mol/ml , 范围100-220 p mol/ml。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 (010)56146198 免费电话:8008109828
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