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可溶性sFAS放免药盒操作说明书 SFAS(HY-H0052) RIA KIT Fas又名APO-1或CD95,属于I型跨膜蛋白,属肿瘤坏死因子家族。Fas通过于与配体FasL或抗Fas的抗体结合来诱导各种细胞的凋亡。其分子结构包括膜外的N末端区、跨膜区和膜内的C末端区3个部分,其中膜外区与其配体FasL结合启动凋亡信号的跨膜传递,跨膜区位于分子结构的中段,胞质区在传递凋亡信号中发挥着关键性作用,故将该区称为“死亡区域”。 血清sFas被认为是凋亡的抑制因子。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)被认为是与Fas受体有关的细胞凋亡诱导因子。目前普遍认为sFas的来源可能是淋巴细胞、肿瘤细胞、或由靶细胞释放,也有可能是由mRNA异常剪切产生。 该药盒主要应用范围: * 肿瘤疾病的研究 * 肝炎疾病研究 * CHF疾病的研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1、 SFAS缓冲液1瓶 2、 SFAS(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3、 SFAS标准品7瓶,浓度为0、1、2、4、8、16、32 ug/L 4、 SFAS抗体 1瓶。 5、 125I –SFAS 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: SFAS RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- SFAS 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<100pg/ml。 3、 标准曲线范围:0-4000ng/L 4、 批内变异系数:CVw<7.1%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 2.26±0.87 ug/L 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业 园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编: 100085 电话: (010)88114651 免费电话:8008109828
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