科研药盒，慎用于临床
乙醇试剂盒说明书
Ethanol (HY-NE072) KIT
测定原理: 乙醇在乙醇脱氢酶的催化下氧化脱氢生成乙醛，同时，NAD 被还原生成 NADH，NADH 在 1-mPMS 的作用下使 WST-8 显橙黄色，通过 450 nm 下测定吸光值变化可测得乙醇含量。 试剂盒组成： 试剂一：液体 12 mL×1 瓶,4℃保存； 试剂二：粉剂×1 瓶, -20℃保存；临用前加入 6 mL试剂三充分溶解待用，用不完的试剂分装 后-20℃保存； 试剂三：液体 10 mL×1 瓶,4℃保存； 试剂四：液体 1.5mL×1 管， 4℃避光保存。 操作步骤： 工作液配制： —————————————————————— 试剂名称 体积（μL） —————————————————————— 试剂一 100 试剂二 50 试剂四 10 —————————————————————— 乙醇操作步骤 单位（ul） ——————————————————————— 试剂名称 样本 标准品 ——————————————————————— 样本 40 —— 标准品 —— 40 工作液 160 160 ———————————————————————— 混匀后记录 450nm 下测定初始吸光值 A1，和 37℃避光孵育 10min 后的吸光值 A2，计算⊿A=A2-A1 结果计算： 标准条件下测定回归方程为 y = 0.0256x + 0.0055 R 2 = 0.9991； x 为乙醇含量（μmol/mL），y 为吸光值差值△A。 1. 按照血清（浆）体积计算 乙醇含量（μmol/mL）= (△A-0.0055)÷0.0256=39.1×(△A-0.0055) 2. 按照样品质量计算 乙醇含量（μmol/g 鲜重）= [ (△A-0.0055)÷0.0256×V1]÷(W ×V1÷V2）= 39.1×(△A-0.0055)÷W 3. 按照细菌或细胞密度计算 乙醇含量（μmol/10 4 cell）= [ (△A-0.0055)÷0.0256×V1]÷（500×V1÷V2）=0.078×(△A-0.0055) V1：加入反应体系中样本体积，0.04mL；V2：加入提取液体积，1 mL； Cpr：样本蛋白质 浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万； 注意事项： 测定前取 1-2 个样做预实验，若△A﹥0.3 或乙醇含量﹥10μmol/mL，需将样本用蒸馏水稀释 后再测定，以确保测定的准确性。 最低检测限：0.02μmol/mL。 地址：北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编：100085 电话：010-88114651 传真：010-88112680 免费电话：8008109828
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