ATP酶K+Na+-ATP、Ca2+Mg2+-ATP-北京华英生物技术研究所

科研药盒，慎用于临床

ATP酶试剂盒说明书

K⁺Na⁺-ATP、Ca²⁺Mg²⁺-ATP(HY- HY-M0025)KIT
ATP酶又称为三磷酸腺苷酶，是一类能将三磷酸腺苷（ATP）催化水解为二磷酸腺苷（ADP）和磷酸根离子的酶，是一个释放能量的反应。ATP酶存在于组织细胞膜及细胞器膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它可以运送物质、转换能量和传递信息等作用。

Na⁺K⁺ATP酶参与细胞内外Na⁺与K⁺的主动跨膜转运,维持细胞内高K⁺、细胞外高Na⁺的离子浓度梯度,而Ca²⁺- Mg²⁺ ATP酶是将细胞内Ca²⁺泵出细胞外,维持细胞内低Ca²⁺水平。

检测原理：ATP酶水解底物ATP生成ADP释放无机磷，通过测定无机磷的量测定ATP酶的活力。

试剂盒组成：

试剂1：A液 1瓶

试剂2：B液 1瓶

试剂3：C液 1瓶

试剂4：D液 1瓶

试剂5：E液 1液

试剂6：基质液 1瓶

试剂7: 磷标准液 1瓶

试剂8：标准液 1瓶

操作步骤：

检测操作步骤（单位ul）
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A管 B管 C管 D管 E管
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A液 150 —— —— —— ——

B液 —— 150 —— —— ——

C液 —— —— 150 —— ——

D液 —— —— —— 150 ——

E液 —— —— —— —— 150

样本 —— 100 100 100 100

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混匀，立即37度保温 10分钟（标准管无需保温）

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试剂6 100 100 100 100 100

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3500转/分，离心10分钟取上清液100毫升（标准管可以不离心）

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标准管 A管 B管 C管 D管 E管
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试剂8 100 —— —— —— —— ——

上清液 —— 100 100 100 100 100

试剂7 500 500 500 500 500 500 ——————————————————————————————————————

混匀， 45度水浴20分钟后，冷却至室温，用蒸馏水调零，660nm处读取OD值，将标准品（R8）倍比稀释在机器上分别读取OD值，绘制标准曲线。

其中：A管：对照管、B管：K⁺Na⁺-ATP、C管： Mg²⁺-ATP、D管：Ca²⁺ -ATP、E管：Ca²⁺Mg²⁺-ATP

结果计算：
适用于分光光度计：将标准品用缓冲液（R1）进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标，以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图，待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。

全自动或半自动生化仪直接读取数据，
正常参考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：

人红细胞K⁺Na⁺-ATP:2.5umol/gHb Ca²⁺Mg²⁺-ATP: 5.5umol/gHb

注意事项：
1. 本法在室温（22-25℃）内完成。
2. 本产品仅用于体外诊断，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。
3. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒技术参数

灵敏度：＜0.4 umo/gHB

线性范围：0-15umol/gHB

本实验回收系数：95.2%~98.4%
变异系数： 0.72%~2.51%

有效期：6个月
生产批号：20200110

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