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                    科研药盒,慎用于临床          

乙醇脱氢酶试剂盒说明书

                         ADH (HY-M0082) KIT    

乙醇脱氢酶(acohol dehydrogenase,ADH)是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常.

测定原理:

 ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+NADH340nm处有吸收峰,而NAD+没有;测定340nm 吸光度下降速率,来计算ADH活性。  

试剂盒组成:

试剂一:碱性缓冲液            1瓶

试剂二:反应液 (内含NAD+)   1瓶

试剂三:乙醇溶液              1瓶

试剂四:标准品            1

操作步骤

1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。12000rpm,4℃离心20分钟。

2细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细菌或细胞(功率30%或300w,超声3秒,间隔7秒。总时间3min);10000rpm,4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。

                    乙醇脱氢酶操作步骤          单位(ul

————————————————————————————————————

                     对照管          标准管          样本

————————————————————————————————————

样本                 ——            ——            100

                   100              ——            ——

标准品               ——            100             ——        

试剂1:               400             400             400

试剂2:               100             100             100

试剂3:                50              50              50

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   充分混匀,1mL石英比色皿,对照管调零,于340nm处测定吸光值A1,迅速置于37℃水浴1min,于340nm处测定吸光值A2,△A=A1-A2。

 计算结果

适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。全自动或半自动生化仪直接读取数据)

 注意事项:

      1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。

2. 本法以定值血清为标准,准确性高。

     3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮   肤和眼睛,切勿吞咽。

     4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。

本试剂盒主要技术指标:

1、线性范围:0-100 U/L

2、精密度:批内变异系数:CVw<7.3%

      批间变异系数:CVw < 10%

3、灵敏度:<0.1 U/L

生产日期:2017-01-15

有效日期:2017-07-15

生产批号:20170115

地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A北京华英生物技术研究所 

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