科研药盒，慎用于临床
α-葡萄糖苷酶试剂盒操作说明书
α - glucosidase（HY-NE043）KIT
α-葡萄糖苷酶，又称葡萄糖基转移酶（α-glucosidase），系统命名为α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶。它在糖的催化反应中具有水解和转糖苷的双重作用。水解作用可从α-葡萄糖苷、寡糖和葡聚糖的非还原性末端切开α-1,4糖苷键，释放出葡萄糖；转糖苷作用又可将游离出的葡萄糖残基以α-1,6糖苷键转移到另一个葡萄糖或麦芽糖类底物上，从而得到非发酵性的低聚异麦芽糖（简称IMO）。
检测原理：
α-GC分解对-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率计算 α-GC活性。
试剂组成：
提取液：液体50ml 1瓶 4℃保存
试剂1：粉剂 2支，-20℃保存；临用时加双蒸水10ml，充分溶解备用；用不完的试剂扔-20℃保存。
试剂2：液体25ml 1瓶 4℃保存
试剂3：液体80ml 1瓶 4℃保存
标准品：液体 1支，5umol/ml的对硝基苯酚溶液。
操作步骤
一．粗酶液提取：
1. 细菌或培养细胞的处理，收集细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清，按照每1000万细菌活细胞加入1ml提取液，超声波破碎细菌或细胞，（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次），15000g，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
2. 组织的处理：秤取约0.2g组织，加入1ml提取液进行冰浴匀浆；15000g，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
3. 标准样品的准备：取100ul的标准液，加入到400ul试剂三中，得到1umol/ml标准液，十倍稀释到100umol/ml，用蒸馏水倍比稀释:50,25,12.5,6.25,0umol/ml,稀释液用试剂二，100，50,25,12.5,6.25,0umol/ml做标准液。
二．测定步骤和加样表
1. 分光光度计预热30min以上，调节400nm，蒸馏水调零。
2. 加样表
操作步骤 单位（ul）
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对照管 标准管 样本管
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试剂1 —— —— 400
试剂2 500 —— 500
样本 100 —— 100
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充分混匀，放入37℃水浴30min，立即放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，以防止水
分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变）
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试剂1： 400 —— ——
充分混匀，8000g，4℃，离心5min，取上清液
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上清液 500 500 ——
标准液 —— —— 500
试剂3 1000 1000 1000
混匀，室温静置2分钟，用蒸馏水调零，波长400nm 测各管吸光值A
计算⊿A=A测定管-A对照管。 每个测定管需设一个对照管。
计算结果
以各标准管的单位浓度为横坐标，以各管透光度差值为纵坐标作图。（适用于分光光度计）
全自动或半自动生化仪直接读取数据
正常考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：
血清或血浆: 习惯单位467±135mU/g蛋白质(±s). 法定单位467±135U/kg蛋白质.
注意事项：
1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准，准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，应避免直接接触皮 肤和眼睛，切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标：
线性范围：0-10000nmol/L
精密度：批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
灵敏度：<20nmol/L
生产日期：2017-09-25
有效日期：2018-01-25
生产批号：20170925
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