科研药盒，慎用于临床 羧甲基纤维素酶试剂盒操作说明书 CMCase（HY-NE041）KIT 纤维素酶是一种复合酶。酶系包括外切B-1.4-葡聚糖酶。（ExoB-1.4glucanase,EC3.2.1.9）内切B-1.4葡聚糖酶（Endoβ-1.4-glucanase,EC1.2.1.4）和纤维二糖酶。 检测原理： 纤维素酶在一定温度和PH条件下，将纤维素酶底物（滤纸或羟甲基纤维素钠）水解，释放出还原糖。在碱性，煮沸条件下，3.5-二硝基水杨酸（DNS试剂）与还原糖发生显色反应，其颜色的深浅与还原糖（与葡萄糖汁）含量成正比。通过在550nm测定吸光度，可得到产生还原糖的量，计算出纤维素酶的FPA酶和CMCA酶活力，以此代表纤维素酶的酶活力。 试剂组成： 试剂1：缓冲液 1瓶 试剂2：底物液 1瓶 试剂3：显色液 1瓶 试剂4：标准品 1瓶（2mg/ml葡萄糖标准品） 操作步骤 操作步骤 1．酶促反应： 单位（ul） ————————————————————————————————— 对照管 样本 ————————————————————————————————— 匀浆上清 50 —— 煮沸的匀浆上清 —— 50 试剂1 50 50 试剂2 200 200 蒸馏水 50 50 混匀，37度孵育30min后，立即放入沸水浴中煮沸15min，取出流水冷却，4000转每分钟常温离心10min，制备糖化液上清。 2．显色反应： 空白管 标准管 测定管 对照管 ————————————————————————————————— 糖化液上清 —— —— 50 50 蒸馏水 50 —— —— —— 标准液 —— 50 —— —— 试剂3 150 150 150 150 ————————————————————————————————— 混匀，沸水浴反应15min，取出流水冷却 ————————————————————————————————— 蒸馏水 1000 1000 1000 1000 ————————————————————————————————— 混匀，波长550nm,1cm光径，双蒸水调零，测定各管OD值 计算结果 以各标准管的单位浓度为横坐标，以各管透光度差值为纵坐标作图。（适用于分光光度计） 全自动或半自动生化仪直接读取数据 正常考值： 各实验室应建立自己的正常值 注意事项： 1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准，准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，应避免直接接触皮 肤和眼睛，切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 地址：北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编：100085 电话：010-88114651 传真：010-88112680 免费电话：8008109828
|
