睾酮酶联免疫试剂盒使用说明书
T (HY-C0005) ELISA KIT
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于酶联免疫竞争法,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
睾酮(TESTO T)是一个19碳甾体化合物,男性主要由睾丸细胞所分泌,少量来自肾上腺皮质,它是雄性激素中活性最高的成份。女性主要来自肾上腺皮质,其次来自卵巢。测定血清中睾酮的含量对于临床上某些雄性激素代谢异常以及许多分泌疾病的诊断具有很重要的意义。当其升高时,柯兴氏综合症、女性特发性多毛症、多囊卵巢综合症、睾丸细胞瘤等。当TESTO降低时,男性阳萎、性功低下、垂体功能低下、神经性食欲不振等。
样品收集:
取静脉血2ml ,分离血清或者血浆,-20℃保存2个月。
药盒组成:
1) 酶标试剂HRP 1 瓶。
2) T抗体1瓶。
3) T标准品6瓶,浓度0、0.1、0.4、1.6、5、20 ng/ml。
4) 封闭液 1瓶
5) 终止液 1瓶。
6) 96微孔板1块
7) 显色液1瓶。
8) 包被液1瓶
9) 洗涤液
10) 说明书
11) 封板膜
12) 密封袋
操作方法:
1) 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释):
2) 每孔加入抗体100ul包被2小时
3) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
4) 每孔加入封闭液200ul,轻轻晃动混匀,室温静置30分钟
5) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
6) 每孔加入包被液25微升,标本25微升,标准品50ul轻轻晃动混匀
7) 每孔加入HRP100ul轻轻晃动混匀,室温静置60分钟
8) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
9) 每孔加入显色液100ul,轻轻晃动混匀,显色15分钟
10) 每孔加入终止液100UL终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11) 测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行
注意事项
1. 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数
4. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5. 为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少300ul注入孔内,震荡30秒。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
a) 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
b) 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实
本试剂盒主要技术参数:
标准范围:0-20ng/ml
灵敏度:< 0.1ng/ml
精密度:批内变异系数CVw<4 %, 批间变异系数CVw <8%
平均回收率:95%
特异性:与雌二醇、雌三醇、雌酮、去氢异雄酮、胆固醇、皮质醇、醛固酮交叉反应均<0.01
正常参考值:男:成 人:15—78岁:均值:5.62ng/ml ; 范围:2.60—136ng/ml ;
青春期: 1—10岁:均值:6.8ng/ml ; 范围:0— 45ng/ml。
女:成 人:15—81岁:均值:0.43ng/ml ; 范围:0.04— 1ng/ml ;
青春期: 2—10岁:均值:0.69ng/ml ; 范围:0— 3ng/ml
规格: 96T/盒
保存: 2-8℃
有效期: 6个月(2-8℃)。
地址:北京市海淀区上地信息路2号国际创业园1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
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